Chromatographie sur colonne - séparation de pigments de feuilles

Principe

Dans cette étude, un extrait brut de feuilles fraîches uniformément vertes est d'abord séparé en différentes fractions au moyen d'une chromatographie sur colonne. Pour ce faire, l'extrait est ajouté à une colonne remplie d'amidon et tiré à travers la colonne sous une pression légèrement réduite (pour augmenter le débit de la phase mobile) avec de la ligroïne comme éluant. Une séparation se produit dans une zone jaune large et clairement reconnaissable et dans une bande verte étroite. Cela signifie que les xanthophylles (jaunes) sont séparées des chlorophylles (vertes). Si le vide est réduit pendant la séparation, la séparation est bien meilleure, mais elle prend alors beaucoup plus de temps. Chacune des fractions de séparation peut être collectée individuellement et caractérisée en enregistrant ses spectres d'absorption, si nécessaire, ou examinée pour la fluorescence par rayonnement avec la lumière UV.

Avantages

• Optimisé pour les expériences de démonstration : Transformation de la direction horizontale en direction verticale
• Pompe à jet d'eau pratique pour générer facilement la pression négative requise
• Introduction didactique à un processus de séparation de base

Objectifs

Étudier différents pigments foliaires à l'aide de la chromatographie sur colonne.

Ce que vous pouvez apprendre sur

• Chlorophylle
• Chromatographie sur colonne
• Pigments foliaires
• Xanthophylle