Cromatografía en columna - separación de los pigmentos de las hojas

Principio

En esta investigación, un extracto crudo de hojas frescas de color verde uniforme se separa primero en diferentes fracciones mediante cromatografía en columna. Para ello, el extracto se añade a una columna llena de almidón y se hace pasar por la columna a una presión ligeramente reducida (para aumentar el caudal de la fase móvil) con ligroína como eluyente. Se produce una separación en una zona amarilla amplia y claramente reconocible y en una banda verde estrecha. Esto significa que las xantofilas (amarillas) se separan de las clorofilas (verdes). Si se reduce el vacío durante la separación, la separación es mucho mejor, pero entonces la separación también tarda bastante más. Cada una de las fracciones de la separación puede recogerse individualmente y caracterizarse registrando sus espectros de absorción, si es necesario, o examinando la fluorescencia mediante radiación con luz UV.

Ventajas

• Optimizado para experimentos de demostración: Transformación de la dirección horizontal a la vertical
• Práctica bomba de chorro de agua para generar fácilmente la presión negativa necesaria
• Introducción didáctica a un proceso de separación básico

Tareas

Investigar diferentes pigmentos de las hojas mediante la cromatografía en columna.

Lo que puede aprender sobre

• Clorofila
• Cromatografía en columna
• Pigmentos foliares
• Xantofila